시행령 제 12/2012/TT-BYT는 인공수정 및 시험관 아기 기술 절차를 공포함

 

시행규칙

인공수정 및 시험관생식 기술 절차 고시

및 시험관생식

정부가 2007년 12월 21일 제정한 제188/2007/NĐ-CP 호 정부령 "보건부의 직능, 임무, 권한 및 조직구성에 관한 규정"을 근거로 함

정부가 2003년 2월 12일 제정한 제12/2003/NĐ-CP 호 정부령 "과학적 방법으로 출산하기 위한 규정"을 근거로 함

보건부 산모-영아과 장관의 건의를 검토함

보건부 장관은 다음과 같이 인공수정 및 시험관생식 기술 절차를 고시함

목 I
총칙

조 1. 적용범위

본 고시는 인공수정(자궁내 배액 주입), 시험관생식 및 정자 보존, 난소 보존, 난포 보존, 난황선 보존 절차에 대한 절차를 규정함

조 2. 용어 해석

1. 태아 수정 후 9주부터 출생 또는 유산까지의 수정 과정의 결과물임

2. 화학적 임신 혈청 내 βhCG 수치(≥25 IU/L) 또는 조건부로 황체호르몬 지원 없이 요소 내 βhCG 수치가 있는 경우를 말함

3. 임상적 임신 초음파 검사에서 태아 포대를 확인하는 경우를 말함

절 이
무능력 진단 절차

조 제3조. 부부 무능력 진단을 위한 검진 및 검사

1. 원칙: 부부 양쪽 모두에게 병력 문진 및 검진을 동시에 실시함

2. 아내에 대한 사항:

가) 임상 검진:

- 전신 검진;

- 내과 검진;

- 산부인과 검진, 유방 검진.

나) 검사:

- 자궁 및 자궁경부 방사선 촬영;

- 내분비 검사(월경 시작 2-4일 사이에 수행하여 난소 저장량 평가: E2, FSH, LH 및 AMH(월경 중 어느 날이든 가능), 프로게스테론 황체기 측정);

- 초음파 검사: 자궁 및 난소 이상 발견, 월경 시작 2-4일 사이의 2차 난포 카운트;

- 혈액 검사, 생화학 검사;

- 간염 B, 식중독균, 결핵, HIV 검사(현재 HIV/AIDS 예방에 대한 규정에 따라 검사 전 상담);

- 클라미디아 검사;

- 기타 특별 검사(환자에 따라 다름): 시메트로바이러스, 항 포스포리피드, 유방 촬영, 자궁 경부 세포 검사, 유전자 검사.

3. 남편에 대한 사항:

가) 임상 검진:

- 전신 검진;

- 내과 검진;

- 생식기 검진;

나) 검사:

- 간염 B, 식중독균, 결핵, HIV 검사(현재 HIV/AIDS 예방에 대한 규정에 따라 검사 전 상담);

- WHO 기준에 따른 정액 분석 검사.

조 제4조. 독신 여성 무능력 진단을 위한 검진 및 검사

독신 여성은 제3조 제2항 본 고시에 따라 검진 및 검사를 실시함. 독신 여성에게 정자를 제공하는 사람에 대해서는 제3조 제3항 본 고시 제2호에 따라 검사를 실시함

절 III
인공수정 기술 절차

조 제5조. 인공수정 방법으로 무능력 치료를 받는 경우의 상담

1. 요구사항:

가) 상담 담당자는 무능력에 대한 일반 지식을 갖춘 전문의, 간호사 또는 간호조무사로서 환자의 요구를 이해하고, 과학적 방법으로 출산에 관한 법률 및 관련 문제에 대한 지식을 갖추어야 함;

나) 무능력 상담을 위한 별도의 상담실을 설치하고, 상담 도구를 갖추어야 함

2. 상담 내용:

가) 부부의 치료 절차를 설명함(검진, 검사, 난소 자극제 사용(있을 경우), 난소 자극 과정 관찰, 정자 샘플 처리);

나) 자궁 내 정자 주입 예정 시간, 자궁 내 정자 주입 기술 절차;

다) 자궁 내 정자 주입 후 황체 지원, 자궁 내 정자 주입 후 관찰, 임신 시 관찰 방법;

라) 성공률, 아기 발달;

마) 발생 가능한 합병증;

바) 치료 비용.

3. 정자 샘플을 요청하는 경우: 제2항 본 조의 상담 내용을 준수함

조 6. 정자 세척 및 배소 주입 기술 절차

1. 일반사항: 정자 세척은 죽은 정자와 정액을 제거하여 건강한 정자를 얻어 배소 주입 또는 시험관 수정에 사용하는 기술이다.

2. 적응증:

가) 배소 주입 적응증이 있는 경우;

나) 시험관 수정을 위한 정자 세척.

3. 준비:

가) 남성 준비: 성관계 금지 기간을 2일에서 7일로 설정한다;

나) 장비 준비: 센트리프UGE, 10배 및 40배 대물경과 10배 시경, 작업 테이블, 정액 보관용 온돌;

다) 소모품 준비: 뾰족바닥 시험관, 주사기, 피펫, 라미네이트, 라미네이트 덮개, 부부 이름이 기재된 샘플 채취 용기, 정자 세척 및 세정 환경.

4. 절차:

가) 정액 샘플 채취:

- 남성은 성관계 금지 기간을 2일에서 7일로 설정한다;

- 각 개인별로 이름 또는 코드가 기재된 정자 처리용 도구를 준비한다;

- 손과 생식기를 청소한 후 수제 방법으로 정액을 채취한다.

나) 정자 세척 및 세정:

- 정액을 37°C 온돌 또는 실온에서 완전히 해동시키며 평균 30분 동안 유지한다;

- 정액 분석 지표(체적, 해동 시간, pH, 정자 밀도)를 평가한다;

- 세척 및 세정 방법(농도 단계 또는 상승법)을 선택한다;

- 세척 및 세정된 정자 약 0.3-0.5ml를 배소 주입용으로 추출한다;

- 세척 및 세정 후 정자 밀도와 이동성을 재평가한다.

조 7. 배소 주입 기술 절차

1. 일반사항: 배소 주입은 카테터를 자궁 경부를 통과시켜 세척된 정자를 직접 자궁 내부에 주입하는 기술이다. 이 방법의 목적은 무능력한 부부에게 임신 확률을 높이는 것이다.

2. 적응증:

가) 다음 원인 중 하나로 인한 무능력 부부에게 적용:

- 남성의 정자가 약하거나 비정상적이지만 배소 주입으로 치료 가능한 경우;

- 난포 방출 장애로 인한 무능력;

- 원인 미상의 무능력;

- 자궁 내막증으로 인한 무능력;

- 자궁 경부 요인으로 인한 무능력;

- 남성이 정자를 가지고 있지 않아 배우자의 배소 주입을 위해 정자 샘플을 얻어야 하는 경우;

- 정자를 보관해야 하는 경우;

나) 독신 여성에게는 이 방법을 통해 출산을 원하는 경우에 적용.

3. 조건: 최소 한 개의 자궁 관이 통로여야 한다.

4. 준비:

가) 배소 주입을 원하는 배우자 또는 독신 여성 준비: 배우자 또는 독신 여성의 난포 발달을 모니터링하고 자연 주기에서 난포 방출을 기다릴 수 있으며, 남성은 2일에서 7일 동안 성관계 금지를 준수하고 정액 샘플을 채취하며, 샘플은 배소 주입 전에 세척 및 세정된다;

나) 정액 샘플 세척 및 세정을 위한 장비 준비: 제6조 제3항 제2호 본 통지 참조. 추가로 준비해야 할 장비는: 코브, 2개의 소독 클램프, 질과 자궁 경부를 닦는 생리용 소금물 용기;

다) 소모품 준비: 1ml 주사기, 배소 주입용 카테터, 질과 자궁 경부를 닦는 면봉, 생리용 소금물.

5. 절차(배소 주입을 원하는 배우자 또는 독신 여성의 경우):

가) 주입 시점: hCG 주사 후 36시간 또는 24시간과 48시간 후 두 번;

나) 여성은 산부인과 위치로 누워서 복부와 두 다리를 무균 패드로 덮는다;

다) 생리용 소금물로 음부를 닦는다;

라) 코브를 삽입하여 자궁 경부를 노출시킨다;

마) 생리용 소금물로 질과 자궁 경부를 청소한 후 건燥一下这部分韩文并翻译成中文：

e) 정제된 정자를 주사기로 이동시키고, 카테터를 연결한다;

g) 자궁경을 통과한 후 카테터를 조심스럽게 삽입하고 멈춘다;

h) 천천히 정자를 자궁 내부로 주입한다;

i) 부드럽게 카테터를 자궁에서 제거한다;

k) 클립을 제거하고 환자는 30분 동안 휴식을 취한다;

l) 황체 지원: 정자를 자궁 내부에 주입한 후 프로게스테론을 사용하여 황체기 단계를 지원한다;

m) 임신 여부 확인: 정자를 자궁 내부에 주입한 후 14일 후에 임신 검사를 실시한다.

절 IV
시험관 수정 기술 과정

조 8. 시험관 수정에 대한 상담

1. 요구사항: 이 통지 제5조 제1항의 규정을 준수하여 시행한다.

2. 内容：

a) 배우자에게 치료 과정을 설명하는 것에는 임상 검사, 검사 실시, 난소 자극 요법 처방, 약물 사용 기간, 약물 사용 중 모니터링이 포함된다;

b) 난자 추출 예정 시간과 해당 시점에서 정자를 얻는 것이 필요한 이유를 설명한다;

c) 배아 이식 예정 시간;

d) 황체 지원 및 배아 이식 후 모니터링;

đ) 시험관 수정 방법의 성공률;

e) 발생 가능한 부작용;

g) 치료 비용.

조 9. 특별한 경우에 대한 상담

1. 난자 기증 시험관 수정에 대한 상담:

a) 난자 기증 시험관 수정은 고령자, 난포기능부진, 난포반응저하, 유전질환 등이 있는 경우이다.

b) 이 통지 제8조 제2항에서 규정된 배우자에게 상담해야 하는 정보 외에도 다음과 같은 사항을 추가로 상담해야 한다:

- 난자 기증자와 수령자의 서면 동의가 필요하다;

- 난자 기증자가 난소 자극제를 복용할 때, 수령자는 자궁 내막 준비를 위한 약물을 복용해야 한다;

- 성공률은 난자 기증자의 나이에 따라 달라진다;

- 태아의 유전적 특성;

- 난자 추출의 부작용.

2. 남편의 정자 없음 시험관 수정에 대한 상담:

a) 남편은 정자 유무를 확인하기 위해 정관 생검 또는 정관 생검을 받게 되며, 정자가 있으면 남편의 정자를 이용한 시험관 수정을 진행할 수 있다;

b) 정자 수집 방법(정관 생검 또는 정관 생검)과 ICSI(정자 주입 수정) 방법에 대한 설명;

c) 성공률과 비용에 대한 상담;

d) 발생 가능한 부작용에 대한 상담;

đ) 정자를 얻지 못한 경우 다른 사람의 정자를 사용해야 할 수도 있다;

e) 다른 사람의 정자를 사용한 경우 태아의 유전적 특성.

3. 배아 기증 시험관 수정에 대한 상담: 배아 기증을 원하는 부부는 본 조 제1항의 규정을 따르도록 한다.

조 10. 시험관 수정 과정 (IVF)

1. 개요: 시험관 수정 (IVF)은 정자와 난자를 접합시키는 보조생식 기술로서, 수정된 배아는 자궁으로 이식되거나 냉동되어 나중에 사용될 수 있다.

2. 적응증:

a) 자궁관 폐쇄로 인한 불임;

b) 자궁내막증으로 인한 불임;

c) 난자 방출 이상(난자 방출 부족, 난포기능장애, 다낭성 난소 증후군, 고령);

d) 정액 검사 이상으로 인한 불임;

đ) 원인 미상 불임;

e) 자궁 내 정자 주입이 효과가 없는 경우.

3. 금기 사항: 자궁 문제로 인한 불임.

4. 준비:

a) 환자 준비(검진, 상담, 난소 자극);

b) 정자 샘플 준비(정자 세척 및 정제 참조);

c) 장비 준비: 음경 초음파, 작업대, CO₂ 배양기;₂;

d) 소모품 준비: 난자 추출 바늘, 배양 접시, 난자 수집 접시, 페펫, 배양액;

5. 과정:

a) 부부 검진;

b) 필요한 기본 검사 실시;

c) 난소 저장량 평가(호르몬 검사, 월경 첫날 초음파로 측정된 2차 난소 수);

d) 난소 자극(agonist 단기 프로토콜, antagonist 프로토콜, 장기 프로토콜);

đ) 초음파와 에스트로겐, 프로게스테론, LH 호르몬 수치 측정을 통해 난포 발달 모니터링;

e) 난포가 충분히 성숙하면 hCG 주사를 통해 난포 성숙을 촉진한다;

g) hCG 주사 후 34~36시간 경과 시 초음파 안내 하에 음경 경로로 난자 추출;

h) 난자 추출 직후 프로게스테론을 이용한 황체 지원;

i) 동시에 정자 샘플을 수집하고 세척 및 정제를 실시;

k) IVF 또는 ICSI 방법을 통해 난자와 정자를 접합시킨다;

l) 37°C와 5% CO₂ 또는 6% CO₂ 환경에서 배양기에서 배양;₂ 또는 요구되는 배양액에 따라 6% CO₂;₂ 요구되는 환경 유형별로;

m) 수정 후 16~18시간 경과 시 수정 여부 확인;

n) 배아를 배양기에서 2일, 3일 또는 5일까지 계속 배양;

o) 2일, 3일 또는 5일 배아(배아낭) 이식;

p) 계속해서 황체 지원을 위한 프로게스테론 사용;

q) 배아 이식 후 14일 또는 배아blastocyte 이식 후 12일 경과 시 βhCG 검사, βhCG ≥ 25 IU/L로 임신 확정;

r) βhCG 임신 확인 후 28일 경과 시 음경 초음파 검사.

조항 11. 시험관 수정을 위한 정자 세척 과정

1. 일반사항: 본 통지 제6조 제1항의 규정에 따라 시행한다.

2. 지정사항: 시험관 수정을 위해 정자를 세척하는 경우

3. 준비:

a) 남편 준비: 남편은 성관계를 피하고 2일에서 7일 후 정자 샘플을 채취한다.

b) 장비 준비: 현미경, 분리기, 온도조절대, 작업대, 세포 카운팅실

c) 소모품 준비: 뾰족바닥 시험관, 슬라이드 글라스, 세척용 환경, 페펫, 주사기

4. 절차:

a) 정자 샘플 채취: 본 통지 제6조 제4항 제a호의 규정에 따라 시행한다.

나) 정자 세척 및 세정:

- 정제된 정액이 완전히 해제되도록 온도조절대에서 30분간 보관하고, 완전해제 시간 기록

- 일부 정액을 채취하여 밀도, pH, WHO 권고사항에 따른 염색을 통해 비정상률, 생존률 평가

- "농도 단계와 상승법"을 사용한 정자 세척

- 얻어진 정자 덩어리를 시험관 수정에 사용(시험관 수정 또는 ICSI 수행)

조항 12. 시험관 수정을 위한 난자 철출 과정

1. 일반사항: 난자는 초음파 안내 아래 음도 경로를 통해 철출되고, 시험관 내에서 정자와 수정된다.

2. 지정사항: 자궁 난소를 자극한 후 난자가 충분히 성숙하면 모든 경우

3. 준비:

a) 여성 준비: 자궁 난소를 자극하여 난자가 충분히 성숙하도록 함

b) 도구 준비: 음도 초음파기, 현미경, 배양대

c) 소모품 준비: 음도 청소용 수액, 멸균 거즈, 컵, 멸균 클립, 포크, 장갑, 시험관, 철출 주사기, 주사기(또는 철출기), 난자 수집 접시, 2구멍 접시, 4구멍 접시, 다양한 환경

4. 절차:

a) 철출 시간: hCG 주사 후 34시간에서 36시간 사이

b) 전신 마취 또는 국소 마취로 통증을 완화하며, 필요시 전신 마취를 병행할 수 있음

c) 여성은 철출 전 식사를 금하고, 철출 전 소변을 모두 배출

d) 음부, 음도, 자궁 경부를 생리용 소금물로 청소

e) 무균 패드를 사용하여 환자의 다리와 배를 덮음

철출 전 철출 주사기와 철출 바늘을 철출 환경으로 세척

f) 초음파 안내 아래 난자를 철출하며, 각 난소마다 하나씩 철출하고, 전체 과정은 부드럽게 진행하며 약한 조명 아래에서 수행

g) 철출된 난자액을 즉시 실험실로 이동하여 난자를 찾고 수집

h) 철출 주사기와 바늘을 다시 세척하여 난자가 바늘과 주사기 내에 남아있지 않도록 함

5. 철출 후 관찰

a) 여성은 철출 후 휴식실에서 휴식

b) 철출 후 1시간에서 2시간 동안 맥박, 혈압, 호흡, 복부 통증, 음도 출혈을 모니터링

c) 철출 후 여성에게 약물 복용 및 배아 이식 예약 일정을 안내

6. 합병증

a) 큰 혈관 손상으로 인한 내출혈, 난소 손상

b) 철출 과정 중 소장, 대장 감염

c) 주사기가 방광을 찔러 방광 출혈 발생

조 13. 배아 이식 절차

1. 개요: 배아 이식은 배아를 수용자의 자궁으로 이식하는 기술로, 배아가 착상하도록 하는 것이다.

2. 적응증: 모든 시험관 수정 과정에서 배아 이식은 난자 추출 후 2일, 3일 또는 5일에 이루어진다.

3. 금기증: 금기증은 없으나, 난포 과형성이나 자궁 내막 준비가 완료되지 않은 경우 등 일부 상황에서는 배아 이식을 연기할 수 있다.

4. 준비:

a) 배우자/독신 여성 준비: 난자 추출 후 프로게스테론 사용 또는 동결 배아 이식 또는 난자, 배아 얻기 시에는 에스트로겐과 프로게스테론을 사용하여 자궁 내막을 준비한다.

b) 도구 및 장비 준비: 배아 이식을 초음파 안내 하에 수행하기 위한 초음파 기계, 삽입기, 소독 클램프, 자궁 경부 클램프, 자궁 경부 확장기(필요한 경우), 용수 컵, 렌즈 등.

c) 소모품 준비: 질 청소용 거즈, 자궁 경부 청소용 면봉, 자궁 경부 청소용 환경, 배아 이식용 카테터, 배아 이식 준비용 접시.

5. 과정:

a) 배아 이식 시간: 2일, 3일 또는 5일;

b) 배아 이식 접시에 배아를 준비하고, 이름과 파일 번호를 정확히 확인한다;

c) 배우자/독신 여성은 방광을 채워야 한다;

d) 산부인과적 위치로 누운다;

đ) 음부 부위를 청결하게 한다;

e) 삽입기를 열고, 배아 이식 환경으로 자궁 경부를 청소한다;

g) 초음파를 통해 배아 이식 카테터 외부를 자궁 경부를 통과시키며 자궁 경부까지 부드럽게 넣는다;

h) 배아 이식 카테터 외부를 자궁 경부까지 넣은 후, 배아 이식 카테터 내부에 배아를 흡입하도록 병리학자에게 알린다;

i) 배아를 담고 있는 배아 이식 카테터 내부를 자궁 내부로 부드럽게 넣어, 카테터 끝이 자궁 바닥에서 약 2cm 떨어진 곳에 위치시킨다;

k) 배아를 자궁 내부에 부드럽게 배치하며, 5개 이상의 배아를 이식하지 않는다;

l) 자궁 내부에서 카테터를 부드럽게 제거한다;

m) 카테터를 다시 청결 상태를 확인하고, 남아있는 배아가 없는지 확인한다;

n) 삽입기를 제거한다;

o) 배우자/독신 여성은 집으로 돌아가기 전에 최소 30분 동안 휴식한다;

p) 황체 지원.

조 14. 정자 주입 수정 과정 (ICSI)

1. 개요: 정자 주입 수정은 정자를 직접 난자 세포질에 주입하여 수정을 유도하는 미세작업 기술이다.

2. 적응증:

a) 중증 정액 이상으로 인한 불임 (양이 적거나 약하거나 이상형태);

b) 역방향 사정;

c) 정자 모자와 정소에서 추출한 정자;

d) 이전 시험관 수정 과정에서 수정 실패의 과거력;

đ) 시험관 내 난자 성숙 과정 (IVM);

e) 동결 후 해동된 난자 사용 과정;

g) 고령 여성 (> 40세).

3. 준비:

a) 난자와 정자의 준비;

b) 도구 및 장비 준비: 현미경과 미세작업 장비, 난자 고정용 바늘과 주사바늘, 현미경 조정기, 배양기;

c) 소모품 준비: ICSI 작업용 접시, 환경, 위에 덮는 오일;

4. 절차:

a) 정자를 ICSI를 위해 "농도 단계 - 상승" 방법 또는 "농도 단계" 방법으로 준비한다;

b) 추출된 난자는 1시간에서 3시간 동안 따뜻한 온도의 배양기에서 보관한 후 기술을 수행한다;

c) ICSI 작업용 접시 준비;

d) 현미경과 미세작업 장비 조정;

đ) 난자에서 세포핵을 분리하고, 난자를 1시간 동안 배양한다;

e) 난자 세포질에 정자를 주입한다;

g) 정자를 주입받은 난자를 37°C, 5% CO₂ 배양기에서 배양한다;₂;

h) 수정 여부를 16시간에서 18시간 후 확인한다.

조 15. 수술적 정자 채취 절차

1. 개요: 수술적 정자 채취는 정관 또는 정소에서 정자를 추출하여 정자 주입 난자 병변 기술을 통해 난자와 수정시키는 기술이다.

2. 적응증: 정관 또는 정소에서 정자를 추출하지 못하는 경우(아조스페르미아), 정액 분비 장애.

3. 비적응증: 생검 진단 후 정자가 없는 경우.

4. 상담: 본 통지 제9조 제2항의 규정에 따라 수행한다.

5. 검진:

a) 과거력 문진;

b) 전신 검사;

c) 생식기 검사: 정소 체적, 정관, 정관 체적 측정.

6. 검사:

a) 성 호르몬 측정;

b) 기본 검사: 혈액, 응고 검사, 간염 B, 식생병, 결핵, HIV.

7. 준비:

a) 환자 준비: 배우자의 상담 검진;

b) 도구 준비: 소독 클램프, 면봉, 소독 용액, 생리용 소금물, 소독 용액 담는 컵, 센트리프UGE, 현미경;

c) 소모품 준비: 추출을 위한 주사기와 주사기, 정자를 필터링 및 세척하기 위한 다양한 환경, 페트리 접시.

8. 절차:

a) 전신 마취 또는 국소 마취;

b) 생식기와 주변 부위를 생리용 소금물로 깨끗이 닦음;

c) 정관 고정(정관에서 추출할 경우), 또는 정소 고정;

d) 정관 또는 정소에서 추출(추출을 위해 몇 번 더 시도해야 할 수도 있음);

đ) 추출 부위 소독, 출혈 또는 축혈 여부 확인;

e) 추출 샘플에서 정자 찾기(정관에서 추출한 샘플은 정소에서 추출한 샘플보다 쉽게 찾을 수 있음);

g) 정자 필터링 및 세척하여 난자 병변 주입을 위한 사용;

h) 수술 후 관리 지침.

조 16. 정자 냉동 보관 절차

1. 개요: 정자 냉동 보관은 정자를 동결하고 저온 보관 환경에서 보관하는 기술이다. 필요할 때 동결된 정자를 해동하여 사용할 수 있다.

2. 적응증:

a) 방사선 치료 전 암 환자, 정자의 질량을 유지하기 위함;

b) 정관 절제 전 환자, 미래에 자녀를 원할 경우 대비;

c) 척수 손상으로 정액 분비가 불가능한 환자는 전기 자극을 통해 정자를 추출한 후 정자를 동결;

d) 정관 또는 정소에서 추출한 정자는 여러 차례 생검을 피하기 위해 동결 가능;

đ) 보조생식 기술을 준비하려는 환자 중 남편이 출장 중인 경우;

e) 남편이 정자를 얻기 어려운 경우: 정자를 동결하여 배우자가 난자를 추출하거나 준비했을 때 정자를 사용할 수 없도록 방지;

g) 정자를 기증하는 경우, 정자는 정자 뱅크에서 필요한 경우에 제공하기 위해 동결됨.

3. 준비:

a) 환자 준비: 남편으로부터 정자를 추출하여 동결;

b) 도구 준비: 정자 저장 튜브, 저장 용기; 저온 장치(기계를 이용한 저온 처리의 경우);

c) 소모품 준비: 액체 질소, 다양한 환경.

4. 느린 냉동 절차:

a) 세계보건기구의 기준에 따라 냉동 전 정자의 품질 평가;

b) 저온 보관 환경과 균형 맞춤: 정액을 보관 튜브에 넣은 다음 저온 저장 환경을 일정 비율(정액 1ml당 동결 환경 0.5-1ml)으로 혼합하고 잘 섞어(기포 생성을 피함) 실온에서 12-15분간 두움;

c) 포장: 보관 튜브를 포장하고 환자 이름, 코드 및 냉동 날짜 기록;

d) 기계 프로그램에 따른 저온 처리 또는 경험이 있는 저온 처리(손으로 저온 처리);

đ) 액체 질소 보관: 저온 처리 후 알루미늄 막대에 튜브를 연결하고 액체 질소 용기에 보관.

조항 17. 정자 해동 절차

1. 일반사항: 정자는 동결되어 보관된 샘플을 해동하고, 그 후 필터링 및 세척하여 사용하는 기술이다.

2. 적응증:

a) 정자를 해동하여 자궁 내 인공수정에 사용하기 위함;

b) 정자를 해동하여 시험관 수정에 사용하기 위함.

3. 준비:

a) 해동될 정자 샘플 준비;

b) 도구 준비: 37°C의 따뜻한 물이 담긴 컵, 정자 샘플 필터링 및 세척을 위한 도구(필터링 및 세척 과정 참조);

c) 소모품 준비: 정자 샘플 필터링 및 세척을 위한 도구.

4. 절차:

a) 동결 샘플 튜브를 액체 질소에서 꺼내어 외부의 얼음 층이 녹을 때까지 실온에서 01부터 03초간 두어둠;

b) 튜브를 37°C의 따뜻한 물 속에 10분부터 20분간 넣어둠;

c) 세계보건기구의 기준에 따라 해동 후 정자의 품질을 평가함;

d) 해동된 정자 샘플은 자궁 내 인공수정(IUI) 또는 시험관 수정을 위해 필터링 및 세척되어 정자를 주입한다.

조항 18. 난소 조직 저온 보관 절차

1. 일반사항: 난소 조직은 생검되고 동결되어 저온 보관 환경에서 보관되는 기술이다. 필요할 경우 정자를 분리하여 사용할 수 있다.

2. 적응증: 정자가 없는 무정자증 환자, 난소 조직 생검에서 정자가 발견된 경우를 저온 보관하여 여러 번의 생검을 피하도록 한다.

3. 준비:

a) 환자 준비: 검진 및 상담;

b) 도구 준비: 소독 클램프, 소독 용액 컵, 칼, 나이프, 동결 장비, 난소 조직 튜브, 난소 조직 저장 용기;

c) 소모품 준비: 페트리 접시, 동결용 환경, 액체 질소, 소독 용액.

4. 절차:

a) 환자에게 검진, 검사 및 상담을 진행하며, 정자 추출과 유사한 방법으로 진행한다;

b) 난소 조직 생검을 진행하고, 세척을 위해 환경 용기에 담아둠;

c) 전용 클램프로 난소 조직을 잘라내고, 정자의 존재 여부를 확인하며, 역방향 현미경을 통해 이동성을 평가함;

d) 각각의 정자 생성관을 분리하여 동결을 진행함;

e) 보존제를 분리된 정자 생성관에 첨가하고, 잘 섞어 저온 저장 튜브에 넣음;

f) 튜브를 실온에서 두고, 프로그램에 따라 온도를 낮춤;

g) 샘플을 액체 질소 용기에 넣어 보관함.

조항 19. 난소 조직 해동 절차

1. 일반사항: 동결되어 보관된 난소 조직을 해동하여 정자를 분리하는 기술이다.

2. 적응증: 난소 조직 저온 보관이 필요한 경우, ICSI를 위해 정자를 추출하기 위함.

3. 준비:

a) 난소 조직 튜브 준비;

b) 도구 준비: 현미경;

c) 소모품 준비: 정자 필터링 및 세척을 위한 다양한 환경, 페트리 접시.

4. 절차:

a) 난소 조직 튜브를 액체 질소 용기에서 꺼내어 실온에서 15분부터 30분간 두어둠;

b) 난소 조직을 세척용 환경으로 세척함;

c) 난소 조직 샘플을 IVF 환경이 담긴 페트리 접시에 넣어 정자를 찾기 위해 조직을 잘라냄;

d) 정자의 이동성을 평가함;

e) 정자를 37°C, 5% CO₂ 환경에서 24시간 동안 배양함;₂ f) 다시 정자의 이동성을 평가하고 ICSI를 위해 사용함.

e) 정자의 운동성을 다시 평가하고 ICSI를 위해 사용한다.

조 20. 난자 냉동 절차

1. 일반사항: 난자는 난자를 난소에서 제거한 후 동결하고 저온 보관 환경에서 보관하는 기술이다. 여성의 임신 준비가 되면 난자는 해동되어 ICSI 방법으로 정자와 수정되며, 배아는 자궁으로 이식된다.

2. 적응증:

a) 수술적 난소 절제가 필요한 병리학적 사례;

b) 난자를 추출한 후 정자 샘플을 얻지 못한 사례;

3. 준비:

a) 환자 준비: 난소 자극, 난자 추출, 세포 분리;

b) 장비 준비: 페트리 접시, 액체 질소 용기, 난자 저장 콤포넌트, 난자 저장 용기, 현미경;

c) 소모품 준비: 피펫, 주사기, 액체 질소, 난자 동결 시 사용되는 다양한 환경;

4. 절차:

난자 냉동과 유사하게, 다양한 난자 냉동 방법이 있으나 현재 대부분의 생식 지원 센터는 유리화 방법을 사용하며, 이 방법은 여러 장점이 있다.

난자는 추출 후 2시간에서 6시간 내에 유리화를 통해 냉동해야 하며, 난자의 상태를 평가하고 동결 전 모든 정보를 기록해야 한다. 환경에 따라 프로세스 단계가 표준 프로토콜과 다를 수 있다.

a) 준비:

- 세척 솔루션 WS(Washing Solution), 유리화 솔루션 VS(Vitrification Solution), 균형화 솔루션 ES(Equilibration Solution)를 25°C에서 27°C까지 준비;

- 난자 저장 콤포넌트에 환자 이름, 나이, 동결 날짜를 기록;

- 액체 질소 용기;

- 동결 전 난자 상태 평가;

- 페트리 접시 준비: 페트리 접시 뚜껑에 WS 한 방울과 ES 세 방울을 넣고, 페트리 접시에 VS를 추가;

b) 난자 냉동:

- 균형화: 피펫을 사용하여 난자를 WS에서 ES로 이동시키며, 평균적으로 3분간 진행한다. 마지막 ES 방울로 난자를 이동시키고, 9분 동안 난자가 원래 형태로 돌아올 때까지 기다린다.

- 유리화: 피펫을 사용하여 난자를 ES에서 VS로 이동시키고, ES 용액을 깨끗이 씻어낸 후, 난자를 저장 콤포넌트에 옮긴다. 저장 콤포넌트를 액체 질소에 담그고, 빠른 냉각을 위해 가로로 놓인다. 플라스틱 튜브를 콤포넌트에 고정한다.

(참고: 작업 시간은 1분 이내이며, 난자를 튜브에 이동할 때 환경 용량을 최소화해야 함)

조 21. 난자 해동 절차

1. 일반사항: 난자는 동결된 후 해동되어 ICSI 방법으로 정자와 수정된다. 난자가 어떤 방법으로 동결되었는지는 그 방법으로 해동된다.

2. 적응증: 난자를 해동하여 정자와 수정하기 위한 경우, 특히 수신자의 자궁 내막을 준비한 경우.

3. 준비:

a) 환자 준비: 수신자의 자궁 내막 준비, ICSI를 위한 정자 샘플 준비, 해동될 난자를 저장할 콤포넌트 준비;

b) 도구 준비: 현미경;

c) 소모품 준비: 다양한 환경, 페트리 접시, 피펫.

4. 절차:

a) 준비:

- 페트리 접시에 해동 솔루션 TS(Thawing Solution)를 넣고 37°C에서 최소 30분간 준비;

- DS(Dilution Solution), WS1(Washing Solution) 및 WS2를 포함한 접시를 준비하고, 해동 접시에 환자 이름을 기록하며, 각 환경을 접시의 각 칸에 기록;

b) 해동:

- 콤포넌트에 기록된 환자 이름, 번호, 동결 날짜 확인;

- 준비된 TS 솔루션을 가진 페트리 접시 위에 현미경을 설치하고, 콤포넌트를 액체 질소에서 꺼내 60초 동안 TS 솔루션에 담근다;

- 피펫을 사용하여 TS 솔루션과 함께 난자를 추출하여 DS 솔루션 접시로 3분간 이동시킨다;

- 난자를 WS1 솔루션 접시로 5분간 이동시킨다;

- 난자를 WS2 솔루션 접시로 5분간 이동시킨다;

- 마지막으로 난자를 미리 준비된 배양 환경 접시로 이동시키고, 난자의 형태와 상태를 평가한다. ICSI는 2시간 후에 수행될 수 있다.

조 22. 배아 냉동 절차

1. 일반적 내용: 배아 냉동은 배아를 동결하고 저온 보관 환경에서 보관하는 기술이다. 여성의 임신 준비가 되면 배아는 해동되어 자궁으로 이식된다.

2. 적응증:

a) 배아 이식 후 남은 배아가 있는 경우;

b) 난소 과자극 위험 또는 난소 과자극이 있는 경우;

c) 자궁 내막 준비가 충분하지 않은 경우에 난포를 제공하는 경우;

d) 자궁 내막 환경이 불리한 경우.

3. 금기 사항: 금기는 없으나 질량이 나쁜 배아는 일반적으로 냉동되지 않는데, 이러한 배아의 해동 후 탈락률이 높기 때문이다.

4. 준비:

a) 냉동 배아 준비;

b) 도구 및 장비 준비: 배아 냉동 바늘, 배아 냉동 용기, 페펫, 주사기, 현미경;

c) 소모품 준비: 페트리 접시, 액체 질소 보관 박스, 액체 질소, 배아 동결 시 사용되는 다양한 환경 미디엄.

5. 과정:

배아 냉동 방법은 다양하지만 유리화 방식은 많은 장점이 있으며 현재 대부분의 생식 지원 센터가 이 방법을 사용하고 있다.

배아의 질량을 평가하고 냉동 전 모든 지표를 기록한다.

a) 준비:

- 유리화 솔루션(VS), 균형화 솔루션(ES) 25°C - 27°C;

- 배아 냉동 바늘(Cryotop)에 환자의 이름, 나이, 동결 날짜(년, 월, 일)를 기록;

- 액체 질소 용기;

- 동결 전 배아의 질량 평가;

- 접시 준비: 첫 번째 칸에 ES 300 µl, 두 번째 칸에 VS 300 µl;

b) 배아 냉동:

- 균형화: 배양 환경에서 배아를 ES 솔루션 위에 15분간 옮겨 놓고 현미경으로 배아 크기가 원래 상태로 돌아왔는지 관찰;

- 유리화: 배아를 ES 솔루션에서 VS 솔루션으로 옮긴 후 페펫을 이용해 배아 위치를 변경하고, 배아를 냉동 바늘 위에 올려놓은 다음 바늘을 액체 질소 속으로 담그는 과정. 이 과정은 최대 1분 이내에 완료해야 한다.

조 23. 배아 해동 절차

1. 일반적 내용: 배아 해동은 동결된 배아를 냉동 용기에 넣어 보관한 후 해동하여 수용자 자궁으로 이식하는 기술이다. 배아가 어떤 방법으로 동결되었는지는 그 방법으로 해동된다.

2. 적응증: 자궁 내막이 충분히 준비된 경우 배아 동결 이식.

3. 준비:

a) 환자 준비: 배아 수용자 자궁 내막 준비;

b) 도구 및 장비 준비: 현미경, 배양기;

c) 소모품 준비: 페트리 접시, 4칸 접시, 배아 해동 시 사용되는 다양한 환경 미디엄.

4. 절차:

a) 준비:

- 해동 솔루션(TS)을 페트리 접시에 담아 배양기 37°C에서 최소 30분간 준비;

- 4칸 접시의 첫 번째 칸에 해동 솔루션(DS), 두 번째 칸에 세척 솔루션(WS1), 세 번째 칸에 WS2를 넣고, 환자 이름을 해동 접시에 기록하며 각 솔루션을 칸에 표시;

b) 해동:

- 환자 이름, 진료 번호, 저장 날짜를 냉동 바늘에 기록 확인;

- 준비된 TS 솔루션을 담은 페트리 접시를 현미경 위에 올리고, 냉동 바늘 또는 난포를 질소에서 꺼내 즉시 TS 솔루션에 1분간 담근다;

- 배아를 DS 솔루션 칸으로 3분간 옮긴다;

- 배아를 WS1 솔루션으로 5분간 옮긴다;

- 배아를 WS2 솔루션으로 다시 세척한다;

- 배아를 미리 준비된 IVF 배양 환경 접시에 옮겨 배양기 CO₂ 37°C에서 배양하고 해동 후 배아의 질량을 평가한다;₂온도 37°C에서 해동 후 난자 상태를 평가한다.

c) 배아는 해동 후 2~3시간 이내에 이식하거나, 배아를 한晩間培養並在第二天移植。

조 24. 동결 배아 이식(FET) 절차

1. 일반: 동결 배아 이식은 동결된 하나 이상의 배아를 냉동해 해동한 후 수용자의 자궁 내막이 준비된 자궁에 이식하는 기술이다.

2. 적응증: 동결 배아가 있는 경우

3. 금기증: 금기증은 없으나, 자궁 내막이 충분히 준비되지 않았을 경우 이식 주기를 취소할 수 있다.

4. 준비:

a) 환자 준비: 자궁 내막 준비

b) 장비 및 소모품 준비: 본 통지 제13조 제4항 별표 b, c에 따른다.

5. 과정:

a) 생리주기 시작 시 호르몬 검사 및 필요한 다른 검사 수행

b) 자궁과 난소 초음파 검사

c) 생리주기 시작 시 에스트로겐으로 자궁 내막 준비

d) 초음파로 자궁 내막 발달 추적

đ) 배아 이식 조건 충족 시 이식 48~72시간 전부터 프로게스테론 사용

e) 다음날 해동 배아의 세포학적 상태 의사에게 보고

g) 배아 해동(냉동 방법에 따라 해동 방법 선택)

h) 해동 배아는 배양 용액에서 배양하고 저장

i) 이식 전 배아의 발달 및 품질 평가

k) 이식 후 3시간 또는 다음날 동결 배아 이식

l) 초음파 지도 하에 배아 이식

m) 이식 전 프로게스테론 및 에스트로겐 사용 계속

n) 이식 후 14일째 βhCG 측정

o) 이식 후 28일째 임신 확인 시 초음파 검사

p) 임신 시 프로게스테론 및 에스트로겐 12주까지 계속 사용

조 25. 체외 성숙(IAM-IVM) 절차

1. 일반: 체외 성숙은 난포 초기 단계의 난포를 자궁외에서 추출하여 배양 플레이트에서 성숙시키고, 정자와 직접 접촉하여 수정한 후 얻은 배아를 수용자 자궁에 이식하거나 냉동한다.

2. 적응증: 과다난포증 위험이 있는 환자(다낭성 난소 증후군, 과다난포증 과거력)에서 과다난포증을 피하기 위해 미성숙 난포를 성숙시키는 경우

3. 준비: 체외 수정과 유사하나 일부 차이점이 있다.

a) IVM 바늘 사용

b) 미성숙 난포 배양 용액 사용

c) 난포 추출 시 필터 사용

4. 절차:

a) 환자에게 FSH 보충

b) 난포 발달 추적

c) hCG 사용

d) 미성숙 난포 추출

đ) IVM 배양 용액에서 24~26시간 동안 미성숙 난포 성숙

e) 난포 세포 분리

g) 정자 직접 배양 세포 내 주입

h) 수정 후 배양

i) 16~18시간 후 수정 확인

k) 배아 2일, 3일 또는 5일 이식

l) 이식 후 14일째 βhCG 측정

m) 이식 후 28일째 임신 확인 시 초음파 검사

조 26. 난소 기증 체외 수정 절차

1. 일반: 난소 기증 체외 수정은 기증자의 난자를 수정하여 얻은 배아를 수용자의 자궁 내막이 준비된 자궁에 이식하는 기술이다.

2. 적응증:

a) 수용자:

- 조기 난소 기능 감소

- 난자 품질 저하

- 난소 반응성 저하(생리 시작 시 FSH 농도 상승, 2차 난포 수 감소)

- 고령 여성(40세 이상)

- 유전적 이상

b) 기증자:

- 규정 연령

- 건강한 자녀가 최소 한 명 이상 있음

- 만약 최근에 출산했으면 출산 후 12개월 이상 경과하고 모유 수유 중이 아님

- 만성 질환 또는 유전적 질병이 없음

3. 난소 기증 부부 상담: 본 통지 제9조 제1항에 따른다.

4. 준비: 본 통지 제10조 제4항에 따라 진행하되, 기증자 준비와 수용자 자궁 내막 준비가 필요하다.

5. 과정:

a) 기증자 전신 및 산부인과 검진 및 검사

b) 기증자와 수용자 부부 간 합의서 작성

c) 기증자와 수용자 사이의 생리주기 조절

d) 기증자 난소 자극과 동시에 수용자 자궁 내막 에스트로겐으로 준비

đ) 기증자 난포 발달 초음파 및 호르몬 검사 추적

e) 수용자 자궁 내막 초음파 검사

g) 난포가 성숙하면 기증자에게 hCG 주사

h) 기증자 난포 추출 및 수용자 프로게스테론 추가 사용

i) 수용자 배우자의 정자 추출 및 정자 세척

k) 정자와 기증자 난자 체외 수정(IVF) 또는 정자 배양 세포 내 주입(ICSI)에 따라 정자 품질에 따라 결정

l) 16~18시간 후 수정 확인

m) 배아 2일, 3일 또는 5일 수용자(부인)에게 이식

n) 이식 후 프로게스테론 및 에스트로겐 사용 계속

o) 이식 후 14일째 βhCG 측정

p) 이식 후 28일째 임신 확인 시 초음파 검사

q) 프로게스테론 및 에스트로겐 12주까지 계속 사용

조 27. 인공수정 시 정자 기증 절차

1. 일반사항: 인공수정 시 정자 기증은 기증자의 정자를 수용자의 난자를 수정하는 기술을 말하며, 수정된 배아는 자궁 내 이식 또는 동결 후 사용될 수 있다.

2. 적응증:

a) 배우자가 정자를 가지고 있지 않은 경우;

b) 유전적 이상이 있는 경우.

3. 정자 기증자의 조건:

a) 전염병에 감염되지 않은 경우;

b) 정신질환 또는 유전질환에 감염되지 않은 경우;

c) WHO 기준에 따른 정상적인 정자 샘플.

4. 정자 기증을 받는 부부에게 제공되는 상담: 본 통지 제9조 제2항의 규정에 따라 이루어진다.

5. 준비: 인공수정 사례와 유사하게 준비되지만, 이 경우 정자 샘플은 기증자로부터 채취된다.

6. 절차:

a) 정자 기증자의 검진 및 검사;

b) 정자 샘플은 미리 채취되어 정자 동결 과정에 사용된다(정자 동결 절차 참조);

c) 난관 자극 프로토콜에 따라 난관 자극;

đ) 난포의 발달을 초음파와 호르몬 측정을 통해 모니터링;

e) 난포가 성숙한 시점에서 hCG 주사;

f) 난자를 추출하고 프로게스테론을 황체 지원;

g) 기증자의 정자 샘플을 세척 및 필터링;

h) 기증자의 정자를 이용하여 난자를 IVF 또는 ICSI 방법으로 수정;

i) 수정된 난자 또는 ICSI 후의 난자를 배양기에서 유지;

k) 수정 확인은 16~18시간 후에 이루어진다;

l) 배아는 2일, 3일 또는 5일째 이식;

m) 배아 이식 후 프로게스테론 사용 계속;

o) 이식 후 14일째 βhCG 측정

p) 이식 후 28일째 임신 확인 시 초음파 검사

q) 황체 지원 프로게스테론은 12주까지 지속된다.

조 28. 선택적 태아 감소 절차

1. 일반사항: 선택적 태아 감소는 초음파 안내 하에 질 경로를 통해 주사침을 사용하여 다태 임신에서 일부 태아를 제거하는 절차이다.

2. 적응증:

a) 배아 이식 후 3개 이상의 태아가 있는 경우, 보통 2개 또는 1개의 배아만 남겨두며, 각각의 상황에 따라 다르다;

b) 이중태 임신의 경우, 각각의 상황에 따라 한 개의 태아를 제거한다.

3. 태아 감소 시기: 이상적인 태아 감소 시기는 7주 3일이다.

4. 상담:

a) 태아 감소의 이유;

b) 태아 감소 절차;

c) 가능한 합병증.

5. 진통 방법: 전신 마취 또는 국소 마취, 전신 마취 전 편마취를 병행할 수 있다.

6. 준비:

a) 임산부 준비: 혈액 검사, 혈액형 및 응고 요인 검사; 임산부는 절차 전 식사를 금하고 소변을 보아야 한다;

b) 장비 준비: 소독 클램프, 초음파 기계;

c) 소모품 준비; 소독 용액 담는 컵, 소독 용액, 주사침, 주사기.

7. 절차:

a) 절차 전 검진 및 마취;

b) 생리염으로 질과 자궁경부를 청소;

c) 임산부의 다리를 덮는 무균 패드를 설치;

d) 초음파를 이용하여 태아 수, 태아 상태, 감소 대상 태아를 재평가. 감소 대상 태아는 주사침 경로 근처에 위치하며 자궁경부 근처에 위치해야 한다;

đ) 초음파 안내 아래 태아 감소 대상 위치에 주사침을 삽입하고 태아에 도달하면 태아를 제거;

e) 작은 태아는 완전히 제거할 수 있으며, 큰 태아는 제거 후 태아 심장 박동이 멈추었는지 확인해야 한다;

g) 큰 태아의 경우, 칼륨 염화물 주사를 태아 심장에 주입할 수 있다;

h) 절차 중 항생제 예방.

8. 태아 감소 후 관찰:

a) 임산부는 침대에서 휴식을 취해야 한다;

b) 절차 후 2시간 동안 맥박, 혈압, 호흡, 복부 통증, 질 출혈을 모니터링;

c) 2일 후 재검진 예약.

9. 합병증:

a) 출혈;

b) 혈관 또는 방광 손상;

c) 감염;

d) 유산 또는 태아 사망.

절 5
시행규정

조 29. 효력 발생

본 통지는 2012년 8월 20일부터 효력이 발생한다.

조 30. 시행 책임

어머니-아이 보건과는 주관하고, 진료 관리국, 법제과 및 관련 부서와 협력하여 이 시행규칙의 지도, 지시, 감독, 감사를 조직한다.

시행 과정에서 어려움이나 문제점이 발생할 경우 각 기관, 단체, 개인은 보건복지부(어머니-아이 보건과)에 서면으로 보고하여 연구하고 해결하도록 한다./.