决定第57/2000/QĐ-BNNPTNT/KHCN号关于颁布行业标准

 

决定

关于发布行业标准

农业农村部部长

根据一九九五年十一月一日国务院令第73号《农业部职能配置、内设机构和人员编制规定》；

根据一九九五年十二月八日国务院令第86号《关于质量监督行政管理职责分工的规定》。

经审议科技与产品质量司司长的建议

决定

第一条： 现发布以下行业标准：

10TCN 422-2000：农产品食品—测定各种籽实中的赖氨酸含量。分光光度法。

10TCN 423-2000：大豆及其制品。测定0.2%氢氧化钾可溶性蛋白的方法。

10TCN 424-2000：大米。凝胶强度的测定方法。

10TCN 425-2000：大米。测定白米率、白米色和白米光泽度的方法。

条2： 本决定自签发之日起十五日后生效。

条3： 各位办公厅主任、科技与产品质量司司长及相关组织和个人负责人对本决定负责执行。

 

标 准

农产品食品—测定各种籽实中的赖氨酸含量。

分光光度法10TCN 422-

（根据2000年5月23日第57/2000/QĐ-BNN-KHCN号决定发布）

本标准适用于谷物籽实（如稻米、小麦、玉米等）和豆类籽实（如大豆、绿豆等），并规定了使用分光光度法测定赖氨酸含量的方法。

1. 取样

按照GB/T 5451-91（ISO 950-1979）进行取样。

2. 原理

利用赖氨酸分子中自由ε-NH₂ 基团与ninhydrin试剂反应生成有色络合物，并在波长540nm处测量其吸光度。标准溶液为loxine溶液，因为loxine分子相当于赖氨酸且仅含一个ε-NH₂.

3. 试剂

所有试剂必须是分析纯。使用的水应为蒸馏水或具有同等纯度的水。

3.1 缓冲液

将30克甲酸钠溶解于60毫升蒸馏水中，加入10毫升86-88%的甲酸溶液，再加蒸馏水至100毫升。

3.2 ninhydrin试剂

将1克纯净ninhydrin和1克CdCl₂.2,5H₂O放入带磨口塞的棕色瓶中。加入25毫升缓冲液（3.1）和75毫升乙二醇，摇匀直至完全溶解。该试剂在4⁰℃下避光保存一个月。

3.3 20%和95%的乙醇溶液。

3.4 2%和4%的碳酸钠溶液。

3.5 标准loxine溶液

称取100毫克纯净loxine，精确到0.1毫克，置于100毫升容量瓶中，用20%的乙醇溶液溶解并稀释至刻度线。1毫升loxine标准溶液含有1毫克loxine。 4. 仪器

- 精确度为0.0001克的天平

- 研磨机

- 孔径为250微米的筛子

- 波长为540纳米的分光光度计

- 自动控温水浴锅

- 容量为18×150毫米的试管

- 容量为100毫升和500毫升的容量瓶

- 容量为1毫升、2毫升、10毫升、20毫升的移液管

- 铝制试管架

- 直径为4.0-4.5厘米的漏斗

定量滤纸。

5. 测定步骤

5.1. 绘制标准曲线

在100毫升容量瓶中依次加入0毫升、10毫升、20毫升、30毫升和40毫升loxine原标准溶液（见3.5）。用20%的乙醇溶液稀释至刻度线并摇匀。各溶液中loxine浓度分别为0毫克/毫升、100毫克/毫升、200毫克/毫升、300毫克/毫升和400毫克/毫升。用移液管准确吸取每种标准溶液0.5毫升，分别加入试管中。向每个试管中加入0.5毫升4%的Na

溶液和2毫升ninhydrin试剂。摇匀样品并在恒温水浴中加热30分钟。然后将试管架浸入冷水中冷却。向每个试管中加入5毫升95%的乙醇溶液，摇匀后在波长540纳米处测量吸光度。₂NaBr₃ 根据测得的吸光度值绘制标准曲线，横坐标为loxine标准溶液浓度（从0到400毫克/毫升），纵坐标为吸光度值。

5.2. 准备样品

从平均样品中研磨约10克样品，使其全部通过孔径为250微米的筛子。

5.3. 进行测定

向试管中加入200-250毫克干净的玻璃珠，称取30毫克准备好的样品（见5.1），准确加入每个试管中。每个样品进行两次平行测定。向试管中加入1毫升2%的Na

溶液。将样品与玻璃珠混合均匀，放置在试管架上并放入已达到80₂NaBr₃ ℃的恒温水浴中保持10分钟。用玻璃棒搅拌使溶液均匀。向每个试管中加入2毫升ninhydrin。摇匀样品并在恒温水浴中加热30分钟。然后将试管架浸入冷水中冷却。冷却后，向每个试管中加入5毫升95%的乙醇溶液，摇匀后过滤并通过直径为4.0-4.5厘米的玻璃漏斗上的定量滤纸过滤。在波长540纳米处测量滤液的吸光度，按照显色顺序进行。⁰如果样品呈现蓝色，则可以用水稀释，并在计算时考虑稀释因子。

样品中的赖氨酸含量根据标准曲线（见5.1）确定，对应loxine溶液浓度范围为0到400毫克/毫升。

6. 结果计算

样品中的赖氨酸含量(X

6.1. ，%)按以下公式计算：₁C：样品中loxine的标准曲线测定浓度，毫克/毫升。

其中：

m：样品质量，毫克。

1000：毫克换算系数。

1.11：loxine换算成赖氨酸的系数。

测定结果为两次平行测定的算术平均值。

样品中的赖氨酸含量以干基表示(X

6.2. ，%)按以下公式计算：₂：样品干基中的赖氨酸含量，%。

其中：

X₁W：样品水分含量，%。

在研究中，样品中的赖氨酸含量通常以蛋白质百分比(X

* 注意：

，%)表示，按以下公式计算：₃：样品干基中的赖氨酸含量，%。

其中：

X₂P：样品干基中的蛋白质含量，%。

大豆及其制品—测定0.2%氢氧化钾可溶性蛋白的方法10TCN 423-2000

 

标 准

本标准适用于大豆及其加工制品，并规定了测定0.2%氢氧化钾可溶性蛋白的方法。

（根据2000年5月23日第57/2000/QĐ-BNN-KHCN号决定发布）

按照GB/T 4847-89（ISO 5506-1988）进行取样。

1. 取样

使用0.2%氢氧化钾溶液分离样品中的蛋白质，并采用凯氏定氮法测定提取液中的氮含量。

2. 原理

0.2%氢氧化钾可溶性蛋白含量按氮含量乘以5.71的系数计算。

所有试剂均需为分析纯。使用的水应为蒸馏水或具有同等纯度的水。

3. 试剂

3.1 0.2%氢氧化钾溶液（相当于0.036N；pH=12.5）

3.2 用于凯氏定氮法测定氮含量的试剂（GB/T 4295-86）

研磨机

- 精确度为0.0001克的天平

孔径为250微米的筛子

筛孔为250毫米

条款具有0.0001g精度的分析天平

磁力搅拌器

转速为2700转/分钟的离心机

容量为250毫升的三角烧瓶

分度容量为10毫升、20毫升的移液管

用于按照Ken丹方法确定氮含量的工具

5.1. 绘制标准曲线

5.1. 样品准备

从平均样品中研磨约10克样品至完全通过250毫米筛孔。

5.2. 蛋白质提取

准确称取1.5-2克根据(5.1)准备的样品放入250毫升三角烧瓶中。每个样品进行两次平行操作。加入75毫升0.2%KOH溶液并使用磁力搅拌器在室温下搅拌混合物20分钟。如果需要，蛋白质提取时间可以超过20分钟。然后以2700转/分钟的速度离心混合物15分钟。将上清液（离心管顶部）转移到干净的三角烧瓶中，用于分析溶解于0.2%KOH中的蛋白质。

5.3. 溶解蛋白质的无机化和氮含量测定

使用移液管准确吸取10-20毫升(5.2)中的蛋白质提取液放入燃烧瓶中进行蛋白质的无机化，并按照Ken丹方法（参照TCVN 4295-86）测定氮含量。

样品中的赖氨酸含量(X

6.1. 溶解于0.2%KOH溶液中的蛋白质含量以质量百分比(X%，%)计算，公式如下：₁，按以下公式计算：(%)：

其中：

a, b：用于滴定空白样品和测试样品的0.1N NaOH溶液体积，毫升。

试验，毫升。

V₁：用于无机化的蛋白质提取液体积，毫升

V₂：用于样品测试中提取蛋白质的0.2%KOH溶液体积，毫升

m：测试样品的质量，克

0.0014：将氮量转换为1毫升0.1N标准溶液的系数

H₂SO₄0.1N

5.71：大豆氮转化为蛋白质的转换系数。

如果两次平行分析结果之间的差异不超过0.3%，则试验结果为算术平均值。最终结果保留到第一位小数。

6.2. 溶解于0.2%KOH溶液中的蛋白质含量以相对于总蛋白质的百分比(X%，%)计算，公式如下：₂，按以下公式确定：(%)：

其中：

X₁：溶解于0.2%KOH溶液中的蛋白质含量，%

P：总蛋白质含量，%

 

标 准

籼稻谷胶体强度测定方法10TCN 424-

（根据2000年5月23日第57/2000/QĐ-BNN-KHCN号决定发布）

本标准适用于碾磨后的籼稻谷或籼米粉，并规定了测定胶体强度的方法。

1. 取样

取样按TCVN 5451-1991（ISO 950-1979）

2. 通用概念

胶体强度基于碾磨后籼稻谷粉的流长特性，可分类如下：

3. 方法内容

通过在稀碱溶液中水解来使籼稻谷粉凝胶化，随后冷却并测量凝胶的流长。

4. 试剂

所有试剂必须是分析纯。使用的水应为蒸馏水或其他同等纯度的水。

4.1. 含有0.03%甲基蓝的95%乙醇溶液

4.2. 0.2N氢氧化钾溶液

5. 仪器

条款具有0.0001g精度的分析天平

孔径为250微米的筛子

孔径为150毫米的筛子

小型摇床：Genic混合器

可调温燃气灶

水浴锅

13×100毫米试管（Pyrex 9820）

铝制试管架

分度容量为1毫升、2毫升的移液管

6. 实验步骤

6.1. 样品准备

从平均样品中研磨约10克样品至完全通过150毫米筛孔。

6.2. 准确称取100毫克根据(6.1)准备的籼稻谷粉放入13×100毫米试管中。每个样品进行三次平行操作。向每支试管中加入0.2毫升含有0.03%甲基蓝的95%乙醇溶液并充分摇匀。

* 注释：95%乙醇溶液用于防止糊化过程中粉粒团聚，而甲基蓝使糊化液着色以便读取结果时更清晰。

再加入2毫升0.2N氢氧化钾溶液并在Genic混合器上以6档速度混合均匀。用玻璃塞盖住试管并将其置于沸腾的水浴锅中加热8分钟。加热期间需确保水浴锅内水的沸腾状态，并保持淀粉颗粒在煮沸过程中的上下运动不超过试管高度的三分之二。

将试管从水浴锅中取出，在Genic混合器上快速摇动，室温下冷却约5分钟，然后在冰水中冷却20分钟以确保凝胶形成良好。

6.3. 准备读取结果

冷却后，将试管放置在刻度为1毫米的水平面上。

在30分钟和60分钟后读取凝胶长度

6.4. 读取并记录凝胶长度

凝胶长度（毫米）是从试管底部到凝胶尖端的距离。测量结果是三次平行实验的算术平均值。

6.5. 分类胶体强度

根据获得的平均凝胶长度，参考分类表（第2部分）对碾磨后的籼稻谷粉的胶体强度进行分类。

* 注释：此测定基于实验基础，因此每次分析时最好同时进行三个不同胶体强度（软、硬、中等）的标准样品的测定。

 

标 准

糙米白度测定方法TCN 425-2000

本标准适用于糙米，并规定了测定白度、银白度和银白度的方法。
（根据2000年5月23日第57/2000/QĐ-BNN-KHCN号决定发布）

1. 定义

本标准中使用的术语和定义如下：

1.1. 白米是指完全去皮且胚乳内部没有银白色斑点的糙米。

1.2. 银白米是指糙米胚乳内部出现银白色斑点的米粒。根据银白色斑点的位置分为：腹银、背银和心银。

* 腹银是指与胚芽在同一侧的带有银白色斑点的米粒。

* 背银是指与胚芽相对一侧带有银白色斑点的米粒。

* 心银（中间银）是指胚乳中部带有银白色斑点的米粒。

1.3. 银白度点和银白度用于评估和分类不同品种或批次大米的银白程度。

2. 取样

按照TCVN 5451-1991（ISO 950-1979）取糙米样品

按照TCVN 1643-1992取原始粒样品

3. 仪器

精度为0.01g的电子秤

银白度测定仪

样品盒

可容纳约50g-100g大米的小盘

4. 测试步骤

4.1. 确定白度和银白度

4.1.1. 确定白度

4.1.1. 确定白度比例

将完整的糙米样品均匀混合，采用对角线方法将大米样品分成分析样品和保留样品。从分析样品中称取50克，每个样品进行两次平行试验。将称量好的样品均匀分布在测定白度的仪器表面上（包括一块有色玻璃板，下方有灯光照射）。选择完全白色的米粒并称重，剩余部分为带银光的米粒。

白度百分比按原始米粒的质量计算，公式如下：

 

 

 

4.1.2 确定银光米粒比例

银光米粒比例（%）= 100% - 白米粒比例（%）

4.2 确定银光点数和银光度

4.2.1 确定银光点数

从平均样品中采用对角线方法分样，取出100颗完整米粒。然后将这些米粒均匀分布在测定银光度仪器的有色玻璃板上，并根据以下六个等级（从0到5）进行分类：

记录不同等级的米粒数量，根据以下公式计算该样品的平均银光点数：

其中：

X：平均银光点数

使用政府经常性预算资金并由中央机关、组织下达订单的公共服务产品（包括公益服务产品和公共福利服务产品）（不包括管理和维护铁路基础设施的服务）₀/H₁/H₂/H₃/H₄/H₅ 是对应于各个等级0、1、2、3、4、5的米粒数量

4.2.2 确定银光度

根据获得的平均银光点数，根据以下分类评估样品的银光度：

*例如：选取100颗完整的糙米粒，在分类后得到不同等级的米粒数量如下：

因此，这种稻米的平均银光点数为150:100 = 1.50

根据上述分类表，该稻米的银光度属于中等银光类别。